顯微鏡作為檢測設備的主要設備之一，而評判顯微鏡性能的重要指標是分辨率。分辨率是指能清楚地分辨兩個(gè)小點(diǎn)或兩線(xiàn)間的小距離。人眼本身就是一臺顯微鏡，在標準照明條件下，人眼在明視距離（*為25cm） 上的分辨率約等于1/ 10mm。對于觀(guān)察兩條直線(xiàn)來(lái)說(shuō)，由于直線(xiàn)能刺激一系列神經(jīng)細胞，眼睛的分辨率還能提高一些。

　　人眼的分辨率只有1/10mm，那么比1/10mm小的物體或比1/10mm近的兩個(gè)微小物體的距離，人眼就無(wú)法分辨了。所以出現了從簡(jiǎn)單的宏觀(guān)放大鏡到微觀(guān)觀(guān)測的光學(xué)顯微鏡，繼而電子顯微鏡。顯微鏡的分辨率定義是指在標本上能清楚分辨的兩個(gè)小點(diǎn)之間的小距離。其計算公式為：

　　D=0.61λ／NA

　　式中：D 為分辨率（um）；λ 為光源波長(cháng)（um）；NA 為物鏡的數值口徑（也稱(chēng)鏡口率）。

　　由公式可得到，顯微鏡的分辨率決定于入射光源的波長(cháng)以及所匹配物鏡的數值孔徑。由此可知，提高光學(xué)顯微鏡的方法：

　　1、增加物鏡的數值孔徑NA.

　　數值孔徑NA=n*sin(u)

　　式中，n為物鏡與標本之間的介質(zhì)折射率；u為物鏡的二分之一孔徑角。因此，從光學(xué)設計上適當采用較大的孔徑角，或者增大折射率成為常見(jiàn)的提高光學(xué)顯微鏡分辨率的方法。一般低倍物鏡如10X以下其介質(zhì)采用空氣，折射率為1，即干燥系物鏡；水浸介質(zhì)是蒸餾水，其折射率為1.33；油浸物鏡介質(zhì)是香柏油或其它透明油，其折射率一般在1.52 左右，接近透鏡和載玻片的折光率，如Olympus 的100X油鏡。水浸物鏡和油浸物鏡不僅放大倍數高而且由于使用高折射率的介質(zhì)，從而提高物鏡的分辨率。

　　2、降低光源波長(cháng)。

　　可見(jiàn)光短波長(cháng)為390nm,若用此波長(cháng)的紫外光作為照明光源，可使光學(xué)顯微鏡的分辨率降低至0.2um。但是由于大多數普通材料的玻璃會(huì )大量吸收340nm以下波長(cháng)的光，紫外光經(jīng)過(guò)大量衰減無(wú)法形成清晰、明亮的圖像。因此不得不使用石英(可透過(guò)低達200nm的紫外光)、熒石(可透過(guò)低達185nm的紫外光)等價(jià)格昂貴的材料，并且紫外光顯微鏡不能用肉眼進(jìn)行觀(guān)察，甚至受觀(guān)測樣品的限制，再加上昂貴的造價(jià)，所以這種提高顯微鏡分辨率的方式由于其自身的局限性而不受廣泛應用。